Gingko biloba leaves extract on growth and morphology of trypanosomatids / Efecto del extracto de las hojas de Gingko biloba en el crecimiento y la morfología de tripanosomátidos

Gingko biloba has been one of the most used medicinal plants all over the world in the past years. In this study, our group has studied the effect of a hydroethanolic extract from the aerial parts of this plant on the growth and morphological differentiation of trypanosomatids. Herpetomonas samuelpessoai and Herpetomonas sp were used in this study. The extract was obtained in a Soxhlet apparatus (50 oC, 2 hours). This extract was aseptically added to Roitman’s medium in different concentrations (4, 20, 40, 60, 80 and 100 mg/ml). The growth rate was determined using a Newbauer chamber to count numbers of cells after the extract inoculation (24 and 72 hours later). Smears stained by the Panotic method was used to determine the percentages of pro, para and opisthomastigote forms. The extract inhibited Herpetomonas sp growth in concentrations higher than 20 mg/ml. H. samuelpessoai has been inhibited in doses higher than 40 mg/ml. No morphological differentiation was observed in Herpetomonas sp cell. However, morphological differentiations could be noticed in H. samuelpessoai cell using doses higher than 40 mg/ml. These alterations are probably related to the cell division process, since cells with 3 or 4 nucleus were observed. Also, cytoplasmatic expansions, representing unsuccessful process of cell division were frequently found out. Further ultrastructural analysis using a transmission electron microscope showed cells with homogeneous nucleus or the absence of it. Protozoan protein profile was also analyzed. It was possible to notice changes in both trypanosomatids used in this study. H. samuelpessoai has shown over expression and accumulation of proteins which its degradation is essential to continue the cell differentiation. Also, it is possible to suggest that this extract acts through the modulation of the genetic expression and may be harmful to human cells if not purified.

Gingko biloba es una de las plantas medicinales más utilizadas en todo el mundo en los últimos años. En este estudio, nuestro grupo ha estudiado el efecto de un extracto hidroetanólico de la parte aérea de esta planta sobre el crecimiento y la diferenciación morfológica de tripanosomátidos. Herpetomonas samuelpessoai y Herpetomonas sp se utilizaron en este estudio. El extracto se obtuvo en un aparato Soxhlet (50° C/2 horas). Este extracto se agregó asépticamente a medio Roitman en diferentes concentraciones (4, 20, 40, 60, 80 y 100 mg /ml). La tasa de crecimiento se determinó utilizando una cámara de Newbauer para contar el número de células después de la inoculación de extracto (24 y 72 horas más tarde). Frotis teñidos por el método Panotic se utilizó para determinar los porcentajes de pro, para y las formas opistomastigota. El extracto inhibió el crecimiento Herpetomonas sp en concentraciones superiores a 20 mg /ml. H. samuelpessoai se ha inhibido en dosis superiores a 40 mg /ml. No se observó diferenciación morfológica en la celda Herpetomonas sp. Sin embargo, las diferenciaciones morfológicas se pudo observar en la celda H. samuelpessoai con dosis superiores a 40 mg /ml. Estas alteraciones son probablemente relacionado con el proceso de división celular, ya que las células con 3 o 4 núcleos se observaron. Además, las expansiones citoplasmáticas, lo que representa el proceso fallido de la división celular se encontraron con frecuencia hacia fuera. Un análisis más detallado ultraestructural usando microscopio electrónico de transmisión mostró células con núcleo homogéneo o la ausencia de ella. El perfil de proteínas por Protozoarios también se ha analizado. Fue posible notar cambios tanto en tripanosomátidos utilizados en este estudio. H. samuelpessoai ha demostrado a lo largo de expresión y la acumulación de proteínas que su degradación es esencial para continuar con la diferenciación celular. Además, es posible sugerir que este extracto...

Confecção de piloros artificiais em íleo terminal sem secção de musculatura em ratos: estudo anátomo-patológico / Artificial pylorus with no musculature section in terminal bowel in rats: anatomo-pathological study

OBJETIVO: Estudar, experimentalmente, a diminuição do trânsito intestinal através de piloros artificiais no íleo terminal de ratos, sem secção da musculatura entérica. MÉTODO: O estudo foi realizado em 40 ratos distribuídos em dois grupos de 20 animais cada. Foram confeccionados quatro piloros no íleo terminal de cada animal, com pontos sero-musculares separados, distribuídos circunferencialmente na alça intestinal. O Grupo 1 foi morto com 15 dias e o Grupo 2, com 30 dias. Aferimos as medidas da circunferência do intestino no transoperatório e no momento da necrópsia. RESULTADOS: No Grupo 1 houve dilatação média de 3mm no nível do primeiro piloro e de 4,15mm no quarto piloro. No Grupo 2 a dilatação média foi de 7,50mm no primeiro piloro e de 5,75mm no quarto piloro. No estudo anátomo-patológico ficou evidente a formação bem definida dos piloros. CONCLUSÃO: Não é necessário remover ou seccionar a musculatura do intestino delgado, nem a secção do plexo nervoso próprio do intestino, para promover a dilatação intestinal com esse método e, como consequência, diminuir o trânsito intestinal.

BACKGROUND: To study, experimentally, the reduction of intestinal transit through artificial pylorus in terminal ileum of rats, without sectioning the enteric muscles. METHODS: The study was carried out in two groups of 20 rats each. Four pylori were made in the terminal ileum of each animal with sero-muscular stitches circumferentially spread around the intestinal loop. Group 1 rats were killed after 15 days and those from group 2 after 30 days. The intestinal circumference was measured during surgery and post-mortem. RESULTS: Group 1 showed a mean 3mm dilatation in the first pylorum and 4.15mm in the fourth one. In group 2 the mean dilatation was 7.50 mm in the first pylorum and 5.75mm in the fourth one. The presence of the well defined formation of the pylori were evident from anatomical studies. CONCLUSION: It is thus not necessary to remove or section the small intestine muscles nor section the intestinal neural plexus to promote intestinal dilatation and reduce intestinal transit with this method.

Confecção de piloros artificiais em íleo terminal sem secção de musculatura em ratos: estudo anátomo-patológico / Confection of artificial pylori with no section of musculature in terminal bowel in rats: anatomo-pathological study

O trânsito intestinal acelerado pode acarretar problemas clínicos graves e seu controle, às vezes, é difícil de se obter. Objetivo: visando estudar a diminuição do trânsito intestinal foram confeccionados quatro piloros artificiais no íleo terminal, sem secção de musculatura entérica. Método: o estudo foi realizado em 40 ratos distribuídos em dois grupos de 20 animais cada. Foram confeccionados quatro piloros no íleo terminal de cada animal, com pontos sero-musculares separados, distribuídos circunferencialmente na alça intestinal. O Grupo 1 foi morto com 15 dias e o Grupo 2, com 30 dias. Aferimos as medidas de circunferência do intestino no transoperatório e no momento da necropsia. Resultados: no Grupo 1 houve dilatação média de 3mm no nível do primeiro piloro e de 4,15mm no quarto piloro. No Grupo 2 a dilatação média foi de 7,50mm no primeiro piloro e de 5,75mm no quarto piloro. No estudo anátomo-patológico ficou evidente a formação bem definida dos piloros. Conclusão: não é necessário, pois, remover ou seccionar a musculatura do intestino delgado, nem a secção do plexo nervoso próprio do intestino, para promover a dilatação intestinal com esse método e, como consequência, diminuir o trânsito intestinal.

Isquemia e reperfusäo hepática total associada ao estado de choque hemorrágico controlado: efeitos no sequestro de neutrófilos no pulmäo do rato / Total hepatic warm ischemia and reperfusion associated with controlled hemorrhagic shock: effects of neutrophil sequestration in lung of rats

OBJETIVO: Estudar os efeitos da isquemia e reperfusäo hepática total sobre acúmulo de neutrófilos no interstício pulmonar de ratos, em condiçöes de normalidade e submetidos ao estado de choque hemorrágico controlado. MÉTODOS: 32 ratos Wistar, machos, foram divididos em quatro grupos de oito animais cada: grupo Sham, submetido aos procedimentos padröes com um período de 60 minutos de observaçäo; grupo Choque, submetido a choque hemorrágico controlado (PAM = 40 mmHg, 20 min.) seguido de reposiçäo volêmica (Ringer lactato + sangue, 3:1) e reperfusäo (60 min.); grupo Pringle, submetido a isquemia hepática total (15 min.) e reperfusäo (60 min.); grupo Total submetido a choque hemorrágico controlado (15 min.) seguido de reposiçäo volêmica (Ringer lactato + sangue, 3:1) e reperfusäo (60 min.). Após o sacrifício dos animais, procedeu-se à contagem de neutrófilos no interstício pulmonar. RESULTADOS: Os valores encontrados para contagem de neutrófilos no interstício pulmonar indicaram que, os animais dos grupos Pringle, Total e, também, do grupo Choque, näo diferiram dos animais do grupo Sham com valores de (Sham 21,08ñ 14,12; Choque 35,15ñ 18,74; Pringle 19,78ñ 15,38; Total 23,90ñ 16,37) (p=0.253) CONCLUSAO: Em ratos submetidos a estado de choque hemorrágico controlado associado a isquemia hepática de 15 minutos, seguida de 60 minutos de reperfusäo, näo ocorreu acúmulo significativo de neutrófilos no interstício pulmonar.